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Vectorlabs核酸印跡工作流程
發布時間： 2022-11-25 點擊次數： 936次北京華新康信現貨 大力回饋新老客戶，現貨打折出售，現有品牌和種類，新老客戶可以自由選購：Vectorlabs北京試劑
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核酸印跡工作流程核酸(脫氧核糖核酸或核糖核酸)的純化、角色塑造和鑒定往往需要在印跡應用中對目標進行分析。核酸通常用凝膠電泳按大小分離，然后轉移到細胞膜上，用互補探針進行檢測。核酸印跡應用需要高特異性。由于目標序列的特性，所使用的探針對提供這種特異性大有幫助，但靈敏度也取決于目標的豐度和可用于檢測的試劑的質量。載體實驗室支持您的研究，提供了廣泛的試劑和工具包的核酸檢測和分析的印跡。步驟1貼標簽標記用物素、高辛（DIG）、DNP或熒光素等標簽標記核酸探針，使用一步直接方法、基于硫醇的間接標記或特定的5'和3'末端標記技術。標簽的選擇取決于許多因素，包括所需的靈敏度和可用于檢測的儀器。有關更多信息，請觀看我們的視頻“用PHOTOPROBE物素試劑盒進行核酸標記"。 物素和高辛標記試劑 ChromaLink 物素和高辛含有紫外線可追蹤的發色團，使蛋白質和核酸的物素化和高辛化能夠重現。ChromaLink 發色團可以讓你通過一個簡單直接的紫外線掃描來量化結合，這需要幾分鐘，而不是幾個小時。標記定量不需要 HABA/親和素和熒光報告分析所需的標準曲線。ChromaLink 物素和高辛還含有一個 PEG3間隔物，以提高溶解度，減少空間位阻和聚集的蛋白質觀察常規試劑。ChromaLink 標記試劑可在胺反應性 NHS 酯中使用，ChromaLink 物素也可作為巰基反應性馬來酰亞胺使用。QuantTag（數量標記）™ 物素定量試劑盒BDK-2000型SKU單位尺寸價格數量BDK-2000 1套件請咨詢我們的經銷商1.如何申請報價或批量定價？跳到圖像庫的末尾跳到圖像庫的開頭描述規格套件組件文件相關產品引文（18）技術信息描述QuantTag物素試劑盒（BDK-2000）旨在測定溶液中游離物素的量或附著在核酸、蛋白質或其他大分子上的物素分子的數量。該試劑盒可用于準確確定物素標記分子過程的標記效率。我們一起突破 TMCat。沒有。儲存 BDK-2000室溫儲存工具包。物素定量試劑盒設計用于測定溶液中游離物素的含量或附著在蛋白質、核酸或其他大分子上的物素的數量。試劑盒試劑與游離或結合的物素發生化學反應，產生可用分光光度計定量的有色產物。吸光度在可見光中測量，允許使用塑料試管或微量滴定板。分析可以使用這兩種方案中的任何一種。方案的選擇將取決于測定中使用的試管的大小。待測試的樣品(含有未知數量的物素)與試劑盒試劑以及含有已知數量的物素的標準反應。將已知樣品的吸光度讀數繪制成標準曲線。測試樣品的吸光度位于標準曲線上，表示物素的存在量。產品描述產品容量量標簽試劑187.5 mlQuantTag 試劑287.5 mlQuantTag 試劑387.5 mlQuantTag 物素標準1ml: 0.5 mM 該試劑盒含有足夠的試劑以使用1ml 方案(包括每個的標準曲線)進行25次測定或使用0.1 ml 方案進行250次測定。? 避免接觸皮膚協議可以使用兩種方案中的任一種進行測定。選擇方案將取決于測定中使用的反應杯的大小。1 ml含量測定：1ml分析方案適用于1ml試管。反應可以直接在反應杯中進行，也可以進行并在測量吸光度。1.按如下方法制備QuantTag工作溶液：將0.5ml每個樣品的試劑1、0.5 ml試劑2和50µl試劑3。（黃色試劑3在與試劑1和2.）所需總量為6 ml（標準品）加1 ml測試樣品的。工作溶液最多可使用八小時。2.按如下步驟制備物素標準品：添加1µl、2µl、5µl，將10µl和20µl物素標準溶液加入五個試管中的每一個。這些標準將包含0.5 nmol、1 nmol、2.5 nmol、5 nmol和10nmol物素。在第六個反應杯中，不添加物素（這個將用于“歸零"分光光度計）。3.調整物素化分子的濃度物素的數量可能落在標準曲線的范圍內。可運行兩種不同濃度或體積的試樣同時（見注釋A）4.向反應杯中加入20µl或更少的測試樣品。最常見的緩沖液不會干擾測定（見注釋B）。然而可通過包括含有在類似溶液中的未丁基化測試分子（例如DNA或蛋白質）作為物素化樣品。該對照品的吸光度讀數可以然后從測試樣品的吸光度讀數中減去。5.向每個反應杯中加入1 ml QuantTag工作溶液并在室溫下孵育30分鐘。有色反應產物穩定數小時。6.測量試樣和物素標準品的吸光度在535nm處。使用不含物素的標準品，將儀器7.為了測定測試樣品中物素的nmol，使用物素用標準值繪制標準曲線X軸和Y軸上的吸光度，如圖1注釋C所示確定每個物素化分子的物素數量，見注釋C規格更多信息單元尺寸1套件應用免疫組織化學/免疫細胞化學、免疫熒光、原位雜交、印跡應用、ELISA、流式細胞術/細胞分離、糖生物學安全標題警告：套件組件盒子里有什么？試劑1（87.5 ml）*試劑2（87.5 ml）*試劑3（8.75 ml）*物素標準溶液（1ml；0.5mM）該試劑盒含有足夠的材料，可使用1ml方案進行25次測定（包括為每一次建立標準曲線）或使用0.1ml方案進行250次測定。*注意：避免接觸皮膚和眼睛。如果發生接觸，立即用水沖洗。協議可以使用兩種方案中的任一種進行測定。選擇方案將取決于測定中使用的反應杯的大小。1 ml含量測定：1ml分析方案適用于1ml試管。反應可以直接在反應杯中進行，也可以進行并在測量吸光度。1.按如下方法制備QuantTag工作溶液：將0.5ml每個樣品的試劑1、0.5 ml試劑2和50µl試劑3。（黃色試劑3在與試劑1和2.）所需總量為6 ml（標準品）加1 ml測試樣品的。工作溶液最多可使用八小時。2.按如下步驟制備物素標準品：添加1µl、2µl、5µl，將10µl和20µl物素標準溶液加入五個試管中的每一個。這些標準將包含0.5 nmol、1 nmol、2.5 nmol、5 nmol和10nmol物素。在第六個反應杯中，不添加物素（這個將用于“歸零"分光光度計）。3.調整物素化分子的濃度物素的數量可能落在標準曲線的范圍內。可運行兩種不同濃度或體積的試樣同時（見注釋A）4.向反應杯中加入20µl或更少的測試樣品。常見的緩沖液不會干擾測定（見注釋B）。然而可通過包括含有在類似溶液中的未丁基化測試分子（例如DNA或蛋白質）作為物素化樣品。該對照品的吸光度讀數可以然后從測試樣品的吸光度讀數中減去。5.向每個反應杯中加入1 ml QuantTag工作溶液并在室溫下孵育30分鐘。有色反應產物穩定數小時。6.測量試樣和物素標準品的吸光度在535nm處。使用不含物素的標準品，將儀器7.為了測定測試樣品中物素的nmol，使用物素用標準值繪制標準曲線X軸和Y軸上的吸光度，如圖1注釋C所示確定每個物素化分子的物素數量，見注釋C 注A：對于大多數物素化蛋白質，假設每種蛋白質含有2至30 nmol物素nmol蛋白質。通常，5–20µl 1 mg/ml物素化溶液當使用1ml測定。對于0.1 ml的測定，通常使用0.5–5µl的1 mg/ml溶液充足的一些高濃度的物素化蛋白可能不溶于QuantTag工作溶液。如果物素化蛋白未溶解用QuantTag溶液孵育30分鐘后，重復測定具有較低的蛋白質濃度。對于大多數物素化的DNA，假設每10-30個堿基對有一個物素，或每千堿基對33–100個物素。通常，10–20µl 1µg/µl溶液物素化DNA的含量可能在標準曲線的范圍內當使用1ml測定時。對于0.1 ml測定，1–5µl 1µg/µl溶液通常就足夠了。注B：發現以下緩沖液和化合物干擾QuantTag分析（通過添加20µl 100 mM進行測試溶液至1ml QuantTag工作溶液）：疊氮EDTA磷酸鹽雙Tris EPPS管道雙三丙烷HEPES Tricine硼酸鹽咪唑三碳酸酯MES檸檬酸鹽MOPS注C：為了確定每個物素化分子的物素數量，首先確定所測試的物素化分子的量，通過使用以下等式：A x B x 1000C=物素化分子的nmol哪里：A=加入的測試分子濃度（µg/µl）B=加入的測試分子體積（µl）C=測試分子的分子量（µg/µmol）了解測試樣品（n）中物素的nmoles（來源于標準曲線）和測定中測試分子的nmoles（m）以計算分子上物素的數量。
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