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    PUREfrex 刷新了重組無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成

    發(fā)布時間: 2021-06-23  點擊次數(shù): 1534次

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    PUREfrex 刷新了重組無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成。

    COSMO BIO USA網(wǎng)頁 :產(chǎn)品剛剛更新。

    關(guān)于 PURE frex ®

    它不是裂解物。PURE frex ® 是*的基于大腸桿菌成分的重組蛋白質(zhì)合成技術(shù)。你需要的一切。沒有你不知道的。將 PURE frex ®試劑盒視為您的個人臺式蛋白質(zhì)合成機。快速、方便且具有成本效益的應(yīng)用程序僅受您的想象力限制。在短短幾個小時內(nèi)每毫升產(chǎn)生數(shù)百微克。

    PURE frex概述

     

    PUREfrex®是一種超酷、超智能、超有用的體外偶聯(lián)轉(zhuǎn)錄/翻譯系統(tǒng),基于大腸桿菌翻譯機制,但與 S30 翻譯提取物*不同。PUREfrex® 不是提取物。PUREfrex® 是一種重組系統(tǒng),包含高度純化的大腸桿菌核糖體、高度純化的重組蛋白以及轉(zhuǎn)錄、翻譯、氨酰化和能量再生所需的其他高度純化因子。因此,與基于細(xì)胞提取物的系統(tǒng)相比,PUREfrex 試劑盒提供了以前難以想象的反應(yīng)可控性,以及用于純化合成蛋白質(zhì)的明確定義的分子組分混合物。

    您可以使用 PURE frex做一些事情。

     

    產(chǎn)生原核蛋白質(zhì)

    產(chǎn)生真核蛋白質(zhì)

    產(chǎn)生膜蛋白

    產(chǎn)生細(xì)胞毒性蛋白。

    產(chǎn)生二硫鍵蛋白

    確認(rèn)開放閱讀框

    評估突變對 ORF 的影響

    評估氨基酸取代對蛋白質(zhì)活性的影響

    生產(chǎn)標(biāo)記蛋白

    通過非天然氨基酸為蛋白質(zhì)添加官能團。

    為功能域或表位作圖生成截短的蛋白質(zhì)

    核糖體展示

    翻譯機制研究

    合成生物學(xué)

    蛋白質(zhì)折疊研究

    體外區(qū)室化

    超高純度的 PUREfrex 成分可將核酸酶和蛋白酶活性降至很低

    PUREfrex 試劑盒成分經(jīng)過超高純化,可去除污染的核酸酶和蛋白酶。嚴(yán)格去除核酸酶和蛋白酶活性以保持 DNA(或 RNA)模板的完整性并保持 PUREfrex 反應(yīng)蛋白的功能,從而最大限度地獲得完整的目標(biāo)蛋白。此外,使用 PUREfrex 2.0 2.1 試劑盒,RNase ß-半乳糖苷酶的污染大大減少,脂多糖 (LPS) 也減少到每 1 µL 反應(yīng)混合物約 0.1 EU

     

    PUREfrex 套件經(jīng)過格式化,易于操作。適合高通量操作的一步協(xié)議。

     

    基礎(chǔ) Purefrex 套件僅包含 4 個小瓶。溶液 I 包含所有非蛋白質(zhì)成分,溶液 II 包含所有蛋白質(zhì)成分,溶液 III 包含核糖體。第四個小瓶包含用于執(zhí)行陽性對照反應(yīng)的即用型 DNA 模板。要使用 Purefrex 生產(chǎn)蛋白質(zhì),只需將您的模板與溶液 III III 混合并孵育。

     

    可以通過 PCR 輕松制備合適的模板。主要要求包括 T7 啟動子、核糖體結(jié)合位點(Shine-Delgarno 序列)和終止密碼子。

    有關(guān)模板準(zhǔn)備的詳細(xì)信息和提示,請單擊此頁面導(dǎo)航側(cè)欄中的鏈接。

     

    PUREfrex 蛋白質(zhì)組分未標(biāo)記。

     

    如最初所述,所有 PURE 系統(tǒng)蛋白質(zhì)組分都帶有 HIS 標(biāo)簽,以幫助純化目標(biāo)蛋白質(zhì)。因此,在通過離心或過濾去除核糖體后,通過將反應(yīng)混合物通過金屬離子親和色譜柱,可以通過負(fù)選擇從 PURE 反應(yīng)組分中快速純化目標(biāo)蛋白質(zhì)。在 PUREfrex 系統(tǒng)中,蛋白質(zhì)組分沒有被標(biāo)記,不會對標(biāo)記的翻譯蛋白組分對蛋白質(zhì)合成的影響留下任何疑問,并且使用戶能夠通過模板設(shè)計生產(chǎn)帶有任何所需標(biāo)簽或根本沒有標(biāo)簽的目標(biāo)蛋白質(zhì)。 

     

    PURE frex基于 PURE 技術(shù)。

    PUREfrex Gene Frontier 2011 年推出,作為東京大學(xué) Takuy??a Ueda 教授開發(fā)的開創(chuàng)性 PURE 系統(tǒng)技術(shù)(使用重組元件的蛋白質(zhì))的商業(yè)改編(參考文獻 12)。PURE 技術(shù)由轉(zhuǎn)錄、翻譯、氨酰化和能量再生因子組成。所有蛋白質(zhì)因子和核糖體都與底物組裝在一起,包括緩沖液中的氨基酸、NTP tRNA(見下圖)。

     

     

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